Szybkie genotypowanie wirusa zapalenia wątroby typu C.

Szybka identyfikacja genotypu izolatu wirusa zapalenia wątroby typu C (HCV) uzyskanego od dawcy narządu może stanowić sposób na zapobieganie infekcjom przez nowe, genetycznie różne wirusy u biorców, którzy już są dodatni pod względem HCV.1 Obecne metody określania genotypów HCV wymagają co najmniej dwa lub trzy dni. Szybsza, bezpośrednia metoda reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), w której stosuje się surowicę bez potrzeby oczyszczania2, została dodatkowo zmodyfikowana w naszym laboratorium przez skrócenie cykli amplifikacji i zmianę rozcieńczeń próbki. W połączeniu z odpowiednim użyciem enzymów restrykcyjnych, ta metoda może być stosowana do określania genotypów izolatów HCV w około 10 godzin.
Tabela 1. Tabela 1. Enzymy restrykcyjne stosowane do oznaczania genotypów HCV. Niedawno rozszerzyliśmy tę zdolność, wprowadzając dodatkowe enzymy restrykcyjne, które pozwalają na podtypowanie izolatów HCV (Tabela 1). Gdy nasze wstępne wyniki zostały porównane z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu komercyjnej metody hybrydyzacji odwrotnej (INNO-LiPA HCV, Innogenetics), stwierdzono 92-procentową zgodność (w 23 z 25 izolatów). Zastosowaliśmy następujące typy HCV: typ (pięć izolatów); typy 1a, 1b, 2b, 3 i 4 (po trzy izolaty); typ 2 (jeden izolat); i dwa izolaty typów mieszanych; uzyskano dwa niezgodne wyniki: typ 2 i mieszaninę typów 1a i 3 (metodą komercyjną) w porównaniu z typami 2b i 1a (metodą enzymów restrykcyjnych).
Wcześniej informowaliśmy o przenoszeniu nowych genotypów HCV od dawców narządów do biorców pomimo istniejącej wiremii HCV u biorców6. Ponieważ gromadzą się dane sugerujące możliwe korelacje między określonymi wynikami klinicznymi a genotypami wirusa i podtypami, staje się jasne, że konsekwencje wirusowej nadkażenia należy dokładniej zdefiniować. Takie badania mogłyby potencjalnie doprowadzić do zalecenia, że dawcy i biorcy przeszczepów narządów będą dopasowani zgodnie z genotypem HCV. Zdolność do szybkiego określenia genotypu dawcy byłaby warunkiem wstępnym skutecznego wdrożenia takiego zalecenia.
Nasze wstępne wyniki sugerują potrzebę ostrożnego podejścia do transplantacji narządów HCV-pozytywnych i uzasadniają rozszerzenie śledztwa, z weryfikacją genotypów i podtypów poprzez sekwencjonowanie genów. Szybkie i bezpośrednie techniki PCR, w połączeniu z użyciem odpowiednich enzymów restrykcyjnych, mogą umożliwić scharakteryzowanie genotypów i podtypów HCV w ramach czasowych klinicznie istotnych dla przeszczepu narządu.
Niel T. Constantine, Ph.D.
Mohamed Abdel-Hamid, MD, Ph.D.
David Oldach, MD
University of Maryland School of Medicine, Baltimore, MD 21201
6 Referencje1. Sanchez-Tapias JM, Rodes J. Dylematy przeszczepiania narządów od dawców anty-HCV-dodatnich. Lancet 1995; 345: 469-470
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
2. Pistello M, Maggi F, Vatteroni L, i in. Częstość występowania genotypów wirusa zapalenia wątroby typu C we Włoszech. J Clin Microbiol 1994; 32: 232-234
Web of Science MedlineGoogle Scholar
3. McOmish F, Yap PL, Dow BC, i in. Geograficzne rozmieszczenie genotypów wirusa zapalenia wątroby typu C u dawców krwi: międzynarodowe badanie ankietowe J Clin Microbiol 1994; 32: 884-892
Web of Science MedlineGoogle Scholar
4. Jarvis LM, Watson HG, McOmish F, Peutherer JF, Ludlam CA, Simmonds P. Częsta reinfekcja i reaktywacja genotypów wirusa zapalenia wątroby typu C u chorych na wielotransfuzję chorych na hemofilię. J Infect Dis 1994; 170: 1018-1022
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
5. Pontisso P, Gerotto M, Chemello L i in. Genotypy wirusa zapalenia wątroby typu C HCV-1a i HCV-1b: kliniczny punkt widzenia. J Infect Dis 1995; 171: 760-760
Web of Science MedlineGoogle Scholar
6. Oldach D, Constantine NT, Zhang Y, i in. Charakterystyka typu HCV dawcy przeszczepu i biorcy: dowody na ustalenie wiremii typu dawcy wirusa (nadkażenia) u biorców z wcześniejszym zakażeniem HCV. Zaprezentowany na Drugim Międzynarodowym Spotkaniu na temat WZW typu C i powiązanych wirusów, San Diego, Kalifornia, 31 lipca-5 sierpnia 1994 r. Streszczenie.
Google Scholar
(6)
[patrz też: zdrowe kapcie dla dzieci, poliklinika zielona góra rtg, odbudowa zęba na wkładzie z włókna szklanego ]

Powiązane tematy z artykułem: odbudowa zęba na wkładzie z włókna szklanego poliklinika zielona góra rtg zdrowe kapcie dla dzieci